說明 |
劃世代 TALEN/CRISPR 基因工程技術研習會
時間:103年2月13日(四) 14:00~17:00
地點:立夫教學大樓 1 樓 103 講堂講者:陳靖宏(力鈞生物科技有限公司技術總監)
簡介:
基因工程對於學術及臨床研究上佔有著非常重要的角色。由於 TALEN 技術的開發,讓高效率的進行基因剔除變的不是夢事。相繼而來的CRISPR/Cas9技術則是一種由細菌保護機制所改造的全新基因操作技術。由於CRISPR/Cas9在質體構築上較其他基因操作技術,如ZFN, TALEN來得容易,目前已經成為基因剔除的主流技術。並且被廣泛使用在細胞與動植物中,將逐漸去取代如siRNA或Morpholino等基因弱化技術,全面提升至穩定基因剔除的新境界。
CRISPR/Cas9技術特點:
1.容易設計靶點: 靶位設計上限制較少,彈性較大較容易。
2.打靶機率高: 在細胞與動物胚胎中實測後發現效率可達50%以上。
3.脫靶率低: 改良後之D10A nickase特異性高,脫靶效應大大降低,可靠性強。
傳統TALEN技術存在的問題:
1.操作複雜困難: 包含多步PCR的質體構建過程,成功率低。
2.實驗週期較長: 約需10-14天才能完成TALEN質體構建。
3.費用相對昂貴: 組裝經費、人力和時間成本都相對較高。
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