以質譜為基礎分析慢性Β型肝炎在急性發作期蛋白質體學之研討以質譜為基礎分析慢性Β型肝炎在急性發作期蛋白質體學之研討
韓至強
中國醫藥大學
慢性B型肝炎(chronic hepatitis B)是一個全球性健康問題，全球估計患病人數約3.5億。慢性Β型肝炎感染發病過程可分為四個階段：immune tolerance（免疫耐受期），immune clearance（免疫清除期），low or no replication（病毒低複製或無複製期），reactivation（病毒重新激活期）。當血清alanine aminotransferase (ALT)轉氨酶是正常值5倍以上即表示發炎（AE），而且經常發生在慢性Β型肝炎的免疫清除期。目前醫學界還不清楚在臨床上不同程度的Β肝發炎與人體對病毒的免疫反應有何不同。在這項研究中，我們假設在不同程度的Β肝發炎期間，會呈現受病毒影響之不同血漿蛋白質體的免疫發病（immunopathogenic）機制。因此，我們的目標是要獲得以及鑑定這些與免疫發病機制有關的蛋白質體。
為了要了解Β型肝炎在發炎期的血漿蛋白質體，我們利用磁珠的純化再加上基質輔助雷射脫附游離飛行時間質譜儀（MALDI- TOF MS）來研究Β型肝炎的血漿蛋白質體 (Figure 1)。特別是，我們收集了肝功能已呈現代償(decompensation)情況之Β型肝炎病人的血漿，結果發現，與那些沒有肝功能代償情形的患者相比，來自肝功能已呈現代償情況之Β型肝炎病人的血漿中transthyretin (TTR)之離子信號（m/z 1367，2452和2647）均呈現顯著下降。同時，來自apolipoprotein A-IV (APOA4) 的離子信號（m/z 1929）會隨著肝炎發炎程度增加而遞增 (Figure 2)。除了TTR和APOA4，我們發現：來自不同的血漿蛋白complement component 3 (C3); fibrinogen alpha chain (FGA); fibrinogen beta chain (FGB)和kininogen-1 (KNG1)的其他離子信號強弱，也與Β型肝炎發炎程度不同有關。另一方面，我們也發現：來自C3和FGA的不同蛋白質胜肽片段，雖然僅一個氨基酸不同的差異，其質譜信號顯示出相反的強度。再加上C3和FGA總濃度的數據 (Figure 3)，顯示蛋白肽酶(peptidase)的活性強度可能與Β肝發炎程度有關。
目前我們這項研究已發表在Clin Chim Acta (CCA), Aug. 16, 2011, 可是根據我們目前對Β肝發炎和免疫病理的了解，很難對這兩者之間提出非常詳盡的關聯，是有必要再做進一步的研究，以澄清他們之間的關聯性。更深入的研究可包括：進行鑑定與發炎程度不同有關的低濃度血漿蛋白質，以及增加檢體的數量，將有助於在臨床診斷上鑑定出更為可靠的生物標誌。
【相關圖片】
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| Fig. 1. Workflow for clinical proteomic analysis of acute exacerbation in patients with HBeAg-positive CHB. |
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| Fig. 2. Peptide spectra enriched by HIC C18 in patients with HBeAg-positive CHB and healthy controls. |
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| Fig. 3. Analysis of the plasma concentrations of fibrinogen and complement component 3. |
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