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經典液相層析法柱效低，分離周期長，且多不具備線上檢測器，通常作為分離使用。
高效液相層析法是在20世纪60年代發展起來的分離分析方法。1965年，Giddings總結與發展了早期層析理論，並對近代液相層析法動力學理論做出了重要貢獻。1966-1968年間，人們在经經典液相層析法的理論與實踐的基礎上，引入氣相經典液相層析法塔板理論等有關理論及先進的實驗技術，研究成功了高效液相層析法。在此期間，Green、Scott、Snyder及Kirkland等的工作最突出。由於早期以提高輸液壓力而獲得高效率，因此前期稱這種層析法為高壓液相層析法。20世纪70年代，高效固定相逐漸被採用，裝柱技術也不斷改進，使液相層析柱的柱效不斷提高，人們不再採用由提高輸液壓力來提高分析效率的途徑。因此，高效層析柱的液相層析法被稱為高效液相層析法（HPLC）。
高效液相層析譜與光譜聯用的方法，一直是熱門研究課題。20世纪80年代初，出現了二極管陣列檢測器，可得到每個組分的HPLC-UV三維圖譜，可同時獲得定性、定量訊息。80年代末，出現的HPLC-MS、HPLC-NMR等層析法－光譜聯用技術，為解决液相層析定性差的弱點提供了許多成功的方法。由於高效液相層析法具有分離效能高、分析速率快、應用範圍廣等諸多優點，已成為藥物分析中最重要的分析方法及醫學研究與診斷常用的方法之一。 |
